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Dies macht die Unterscheidung und Isolierung von erfolgreich Würmer Sesam von nicht transformierten Zellen erforderlich, ein Verfahren, das als Selektion bezeichnet wird. Derartige Gene werden auch als Würmer Sesam Selektionsmarker bezeichnet. Beispielhaft als positive Selektionsmarker seien genannt: Grossbard E und Atkinson Würmer Sesam eds. Gene wie das Isopentenyltransferasegen ipt aus Agrobakterium tumefaciens Genbank Acc. Selektion auf Cytokinin-freiem Medium Ebinuma H et al.

Verschiedene weitere positive Selektionsmarker sind u. Die im Stand der Technik beschriebenen Systeme haben oft einen oder mehrere der nachfolgenden Nachteile: Zudem erfordern Druck auf Darm-Würmer zurückzuführen sein biotechnologische Arbeiten oft Mehrfachtransformationen.

Besagte transgene Expressionskassetten umfassen: Auch kann die Expressionskassette weitere Funktionselemente wie beispielsweise weitere Selektionsmarker z. DOG R 1 enthalten. Ein weiterer Gegenstand der Erfindung betrifft Verfahren zur Selektion transgener Organismen oder Zellen, umfassend nachfolgende Schritte: So kann die 2-Deoxyglukosephosphat Phosphatse von einer separaten Expressionskassette exprimiert werden.

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Genetische Kontrollsequenzen sind beispielsweise beschrieben bei Würmer Sesam Gene Expression Technology: Glick and Thompson, Chapter 7, " sowie den Würmer Sesam aufgewiesenen Zitaten. Genetische Kontrollsequenzen umfassen insbesondere in Pflanzen funktionelle Promotoren.

Vorzugsweise verwendet man insbesondere einen pflanzlichen Promotor oder click the following article Promotor, der einem Pflanzenvirus oder einem anderen Pflanzenpathogen z.

U, Nukleotide bis oder alternativ ; GenBank Acc. Derartige Promotoren, wie z. Als Kontrollsequenzen geeignete Polyadenylierungssignale sind pflanzliche Polyadenylierungssignale, vorzugsweise solche, die im wesentlichen T-DNA Polyadenylierungssignale aus Agrobakterium tumefaciens. Ein entsprechendes Verfahren ist in US 5, beschrieben. Als Kontrollsequenzen sind weiterhin solche zu verstehen, die eine homologe Rekombination bzw. Die nachfolgende Expression kann transient sein oder aber auch — bevorzugt — stabil nach Insertion beispielsweise unter Verwendung von Selektionsmarkern der Expressionskassetten in das Genom erfolgen.

Weitere im Rahmen der Erfindung geeignete Expressionsvektoren Würmer Sesam weiter unten im Rahmen der Transformationsverfahren beispielhaft beschrieben. Positive Selektionsmarker wirken beispielsweise dadurch, das eine auf die Zelle inhibitorisch wirkende Substanz detoxifiziert wird Bsp.

Bevorzugt sind selektionierbare Marker, die den erfolgreich transformierten Zellen eine Resistenz gegen ein Biozid zum Beispiel ein Herbizid wie Phosphinothricin, Glyphosat oder Bromoxynileinen Metabolismusinhibitor z. Besonders bevorzugte Selektionsmarker sind solche, die eine Resistenz gegen Herbizide verleihen. Beispielhaft als Selektionsmarker seien genannt: Ein synthetisches Pat-Gen ist beschrieben in Becker et al. Herbicide Resistant Crops Duke, S. X; insbesondere das aroA-Gen M Sequenzen sind beschrieben Gen-Bank Acc.

Besonders bevorzugt ist das nptII-Gen. U Position ; Beck et al. N; Position bis Dem Fachmann sind zahlreiche weitere Wirkstoffe der genannten Klassen bekannt. Imidazolinon tolerante Acetolactatsynthasen sind ferner beschrieben unter Würmer Sesam GenBank Acc. Das Gen ist Bestandteil zahlreicher Expressionsvektoren z.

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Die Zelle kann prokaryotisch oder eukaryotischer Natur sein. Diese sind als Gegenstand der Erfindung besonders bevorzugt. Bevorzugte Mikroorganismus sind solche aus Würmer Sesam Gattung Agrobakterium und insbesondere der Art Agrobakterium tumefaciens.

Vol 37, No 1,2 auf Seite 15, Tabelle 6 beschriebene Pilze. Reife Pflanzen meint Pflanzen zu jedem beliebigen Entwicklungsstadium jenseits des Keimlings. Bevorzugt sind Pflanzen nachfolgender Pflanzenfamilien: Die Erfindung wird ganz besonders bevorzugt auf dikotyledone pflanzliche Organismen angewendet.

Insbesondere bevorzugt ist Synechocystis. Unter diesen wieder besonders bevorzugt sind dikotyledonen Pflanzen, insbesondere Raps, Soja und Sonnenblume. Besagte Population kann dabei beispielsweise auch ein Gewebe, eine Zellkultur usw. Insbesondere kann die toxische Konzentration auch von Zellkulturbedin gungen wie Würmer Sesam dem Angebot weiterer Kohlenstoffquellen z.

Dabei ist es nicht zwingend erforderlich, dass die Selektion unmittelbar nach der Transformation direkt mit den transformierten Zellen erfolgt. Die in den Verfahren verwendeten Organismen werden je nach Wirtsorganismus in dem Fachmann bekannter Weise angezogen bzw. Samen desselben bevorzugt in Pflanzen Würmer Sesam. Die Herstellung eines transformierten Organismus bzw. Entsprechende Verfahren sind beschrieben beispielsweise bei Bilang et al. Als Vektoren zur Expression in E. Insbesondere Verfahren wie die Calciumphosphat oder Liposomen vermittelte Transformation oder aber Elektroporation sind bevorzugt.

Wu, Academic Press, S. Bei Pflanzen werden dabei die beschriebenen Methoden zur Transformation und Regeneration von Pflanzen aus Pflanzengeweben oder Pflanzenzellen zur transienten oder stabilen Transformation genutzt. Im Falle dieser "direkten" Transformationsmethoden sind keine besonderen Anforderungen an das verwendete Plasmid gestellt.

Neben diesen "direkten" Transformationstechniken kann eine Transformation auch durch bakterielle Infektion mittels Agrobakterium z. Horsch RB et al. Werden Agrobakterien verwendet, so ist die Expressionskassette in spezielle Plasmide zu integrieren, entweder in einen Zwischenvektor englisch: Würmer Sesam in diesem Fall als Wirtsorganismus fungierende Agrobakterium sollte bereits ein Plasmid mit der vir-Region enthalten.

Ein so transformiertes Agrobakterium kann zur Transformation pflanzlicher Zellen verwendet werden. USA; Bevan et al. Stabil transformierte Zellen d. Zwei oder mehr Generationen sollten vorzugsweise kultiviert Würmer Sesam, um sicherzustellen, dass die genomische Integration stabil und vererblich ist.

Hierbei geht man beispielhaft von Kalluskulturen, einzelnen Zellen z. Protoplasten oder Blattscheiben aus Vasil et al. Aus diesen noch undifferenzierten Callus-Zellmassen kann die Bildung von Spross und Wurzel in bekannter Weise induziert werden. Entsprechende Verfahren sind beschrieben Fennell et al. Die in der transgenen Pflanze zu erzielenden vorteilhaften Effekte umfassen beispielsweise: Angegeben sind ferner wichtige Restriktionsschnittstellen mit ihrer Position.

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